在生物制藥領(lǐng)域，CHO（中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢）細(xì)胞是常用的宿主細(xì)胞，用于生產(chǎn)重組蛋白藥物。然而，在CHO細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中，有時(shí)會(huì)遇到細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長(zhǎng)勢(shì)不佳的問(wèn)題。這種情況可能會(huì)影響藥物的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量。本文將分析可能導(dǎo)致 CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長(zhǎng)勢(shì)不佳的原因，并提出相應(yīng)的解決方案。
CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶后長(zhǎng)勢(shì)不好的原因主要有以下幾點(diǎn)：
1.環(huán)境變化：細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶過(guò)程中，可能會(huì)遇到溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度等環(huán)境因素的變化。這些變化可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)產(chǎn)生影響。例如，溫度的波動(dòng)可能導(dǎo)致細(xì)胞代謝途徑的改變，濕度的變化可能會(huì)影響細(xì)胞的滲透壓平衡，氧氣和二氧化碳濃度的波動(dòng)可能會(huì)影響細(xì)胞的呼吸和酸堿平衡。因此，維持穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)比較重要。
2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足：轉(zhuǎn)瓶后，細(xì)胞可能會(huì)面臨營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足的問(wèn)題。尤其是葡萄糖、氨基酸和維生素等關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)素的缺乏，可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞能量供應(yīng)不足，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝。因此，在轉(zhuǎn)瓶后，需要及時(shí)補(bǔ)充足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以滿(mǎn)足細(xì)胞的生長(zhǎng)需求。
3.代謝廢物積累：細(xì)胞代謝產(chǎn)生的廢物，如乳酸和氨，如果在轉(zhuǎn)瓶后不能及時(shí)清除，可能會(huì)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響。這些廢物積累過(guò)多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)環(huán)境惡化，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和生產(chǎn)力。因此，定期更換培養(yǎng)基，及時(shí)清除代謝廢物，可以使細(xì)胞維持良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。
4.細(xì)胞密度和競(jìng)爭(zhēng)：轉(zhuǎn)瓶后，細(xì)胞密度可能會(huì)增加，導(dǎo)致細(xì)胞間的競(jìng)爭(zhēng)加劇。過(guò)高的細(xì)胞密度可能會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗過(guò)快，代謝廢物的積累增多，以及細(xì)胞間的接觸抑制現(xiàn)象。這些因素都會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和生產(chǎn)力。因此，在轉(zhuǎn)瓶前，需要控制細(xì)胞的密度，避免過(guò)高的細(xì)胞密度對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響。
5.無(wú)菌條件：轉(zhuǎn)瓶過(guò)程中的無(wú)菌操作不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染。細(xì)胞污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，在轉(zhuǎn)瓶過(guò)程中，需要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，包括對(duì)培養(yǎng)器具的消毒、操作人員的無(wú)菌操作技術(shù)等，以防止細(xì)胞污染的發(fā)生。
轉(zhuǎn)瓶后細(xì)胞長(zhǎng)勢(shì)弱的優(yōu)化解決方案：
1. 優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境：確保轉(zhuǎn)瓶后的培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度）與原培養(yǎng)環(huán)境一致，減少環(huán)境變化對(duì)細(xì)胞的影響。
2. 調(diào)整培養(yǎng)基配方：根據(jù)細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求，調(diào)整培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分，確保細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶后能夠獲得充足的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。
3. 定期更換培養(yǎng)基：定期更換培養(yǎng)基，以清除代謝廢物，保持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定。
4. 控制細(xì)胞密度：在轉(zhuǎn)瓶前，控制細(xì)胞的密度，避免過(guò)高的細(xì)胞密度對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響。
5. 加強(qiáng)無(wú)菌操作：在轉(zhuǎn)瓶過(guò)程中，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，防止細(xì)胞污染。
此外，可以使用一些商業(yè)化的添加劑和設(shè)備來(lái)促進(jìn)CHO細(xì)胞的生長(zhǎng)，如使用InstiGRO、InstiSHAKE和InstiTHAW等促細(xì)胞生長(zhǎng)劑。
- InstiGRO：這是一種促進(jìn)CHO或HEK單細(xì)胞生長(zhǎng)的添加劑，可以提高克隆效率，加速手動(dòng)鋪板后細(xì)胞的生長(zhǎng)。與Solentim VIPS系統(tǒng)結(jié)合使用，可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)單細(xì)胞鋪板，從而提高細(xì)胞株開(kāi)發(fā)的效率。
- InstiSHAKE：這是一種專(zhuān)為CHO或HEK細(xì)胞設(shè)計(jì)的振蕩培養(yǎng)補(bǔ)充劑，可以提高細(xì)胞活力，加速細(xì)胞生長(zhǎng)，有助于生產(chǎn)更高密度的培養(yǎng)物，并在一系列培養(yǎng)基中提供批次間的一致性。
- InstiTHAW：這是一種用于冷凍保存細(xì)胞的添加劑，旨在保護(hù)CHO或HEK細(xì)胞在冷凍和解凍過(guò)程中的活力，確保細(xì)胞在冷凍保存后獲得理想的恢復(fù)率。
當(dāng)CHO細(xì)胞在轉(zhuǎn)瓶后出現(xiàn)生長(zhǎng)不良時(shí)，可以通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境、調(diào)整培養(yǎng)基配方、定期更換培養(yǎng)基、控制細(xì)胞密度、加強(qiáng)無(wú)菌操作以及使用商業(yè)化添加劑和設(shè)備等方法來(lái)解決問(wèn)題。通過(guò)這些措施，可以有效地改善CHO細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，提高藥物生產(chǎn)的效率和產(chǎn)品質(zhì)量。
蘇州阿爾法生物16年專(zhuān)注實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、生物試劑、實(shí)驗(yàn)耗材的供應(yīng)商。所提供的細(xì)胞系開(kāi)發(fā)設(shè)備主要包括：?jiǎn)渭?xì)胞測(cè)序儀、納米粒度儀、單細(xì)胞鋪板驗(yàn)證儀，活細(xì)胞成像儀， iPSC基質(zhì)膠，細(xì)胞生長(zhǎng)因子等。
