肝細胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）是近年來發(fā)病率急劇上升的惡性腫瘤之一。肝癌細胞系廣泛應用于各類肝癌的研究。肝癌細胞系的基因組與健康人細胞系的基因組不同。常見的人肝 癌細胞系有PLC、Huh7、Huh7.5、Hep3B、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-H、MHCC9-L等，每一種細胞系都有自己的特點，但是，SMMC-7721,、MHCC9-L已經退出實驗舞臺，由于它們具有與原代肝癌細胞相似的生物學特性，無生物學改變、特性穩(wěn)定、無限制傳代，為肝癌研究提供了理想的體外模型，成為除動物實驗外肝癌疾病研究的又一熱門替代物。
以下是小海星整理的實驗室常用人肝癌細胞株，如果您正在為選擇哪一款肝癌細胞而困惑的話，此文興許會對您有幫助。
1. HepG2 人肝癌細胞
HepG2細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結合蛋白；表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體；該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。
HepG2細胞系基因組和表觀基因組相關文獻的結果統(tǒng)計顯示，HepG2肝癌細胞系的基因組序列創(chuàng)造出更高的基因組特征。充分整合了包括CN、SNPs、SNV等在內的HepG2細胞系的全基因組特征和基因序列，為其他類似細胞系的全基因組鑒定奠定了基礎。朱利安娜等人發(fā)現β-肌酸對人白細胞的殺傷作用比人肝癌細胞更為明顯。單萜類化合物的肝毒性高于HepG2/C3A細胞，優(yōu)于白細胞。體內研究表明β-肌力相關的致癌和致畸效應需要進一步的實驗證實,Arunraj等人發(fā)現，復合納米凝膠對HepG2細胞系具有細胞毒性，Dox幾丁質PLA CNG系統(tǒng)可能是一種有前途的肝癌抗癌藥物傳遞系統(tǒng)。
人肝癌細胞株HepG2在肝臟生理研究中得到了廣泛應用，但肝特異性藥物代謝酶和轉錄因子的表達水平較低。
2. Hep3B 人肝癌細胞
Hep3B細胞建系于1979年，源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細胞產生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原（BHsAg)、白蛋白、巨球蛋白、α-抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin)、轉鐵蛋白、補體（C3)、C3活性載體，纖維原等，具有廣泛的研究價值。
Hep3B肝癌細胞cDNA文庫的建立及對Hep3B肝癌細胞的毒性研究，有助于我們更好地了解肝癌，選擇最佳細胞系進行細胞實驗，因此人肝癌Hep3B細胞系長期以來被用于檢測治療藥物的療效、體外細胞毒性、DNA合成和caspase活性。
人肝癌細胞主要來源于肝癌組織。通過培養(yǎng)肝癌細胞，并在單細胞水平上進行分析，可以更詳細地了解肝癌形成的過程，并將其應用于肝癌生物學研究。使用體外系統(tǒng)進行研究的一個優(yōu)點是，它們可以比體內研究更快、更便宜。例如，如果你想做肝癌細胞增殖的實驗，你可以選擇HepG2或Hep3B肝癌細胞，而不是花太多時間來選擇它們。HepG2、Huh7和Hep3B的基因組和細胞毒性研究已深入，這些基因對肝癌的發(fā)展和晚期藥物的開發(fā)具有重要意義。
3. HuH-7 人肝癌細胞
Hidekazu等人于1982年從高分化肝細胞癌患者的組織中分離和培養(yǎng)了Huh 7，但肝細胞癌細胞的遺傳圖譜尚不為公眾所知。Fumio Kasai等人對Huh7肝癌細胞系進行了M-Fish、SNP微陣列序列和序列分析以確定其圖譜，他們發(fā)現高水平的LOH可以增加染色體重排的可能性，Huh7肝癌細胞在培養(yǎng)過程中對遺傳變異高度敏感，另外，不同的代次在體外實驗中可能有不同的表達模式。Malinen等人發(fā)現，長期分化的Huh-7細胞系是一種很有希望的體外肝毒性和內源性化合物模型，用于藥物檢測等實驗。
Jouan等人發(fā)現HuH-7細胞上調了一些與法尼醇X受體（FXR）和核因子紅細胞2相關因子2（Nrf2）相關的轉運蛋白。這些數據表明，在表達一些主要的肝臟藥物轉運體時，它可能被用來研究藥物與MRP的相互作用。
應用：人肝癌細胞系Huh7的基因組特征對傳代次數非常敏感，分化后的Huh7細胞可能適合于研究藥物代謝酶蛋白表達的肝毒性作用，Huh-7細胞系也常用于研究肝細胞癌的發(fā)病機制，它是一種方便、廉價的替代人肝細胞的方法。
4. MHCC97H 人肝癌細胞
該細胞系由上海醫(yī)科大學中山醫(yī)院建立, 將一名我國39歲男性HCC患者的肝右葉轉移病灶的手術切除標本接種于裸鼠肝內建造出人肝癌裸鼠轉移模型(LCI-D20)而得。已證實, 經過再次分離得到的MHCC97H、MHCC97L及HCCLM33種細胞株，依據它們的轉移特點，雖來源同一父系，但具有異質性，即具有不同的轉移潛能。
MHCC97人肝癌細胞系于1998年從裸鼠人肝癌轉移模型(LCI-D20)體外傳代培養(yǎng)獲得，該細胞系符合一般人惡性腫瘤的病理學和遺傳學特征，細胞呈上皮樣，貼壁生長，血清HBsAg、AFP高表達，成瘤率高且先轉移的靶器官是肺，故證實該細胞系為高轉移特性的人肝癌細胞系。
2001年，研究者從MHCC97細胞系中發(fā)現并分離出不同轉移潛能的2個細胞系MHCC97-H和MHCC97-L，前者肺轉移率可達到一百，后者40%；從生長速度上，前者細胞倍增時間較后者短；穿透人工基底膜能力前者較后者大；前者均較后者活力強、代謝旺。傳代至20代后，兩種形態(tài)學特征及生長速度方面均較穩(wěn)定。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉移潛能的HCCLM3細胞系。
5. PLC/PRF/5 人肝癌亞力山大細胞
PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細胞于1976年建系, 細胞來自一位患有原發(fā)性HCC的莫桑比克男性患者的標本; 為上皮樣貼壁生長; AFP陽性, 不產生白蛋白; 分泌ad亞型的HBsAg而不產生HBcAg或HBeAg和Dane顆粒, 卻可維持HAV的繁殖; 該細胞可能含有全部HBV基因組, 同工酶譜及核型與人類同源;裸鼠異種移植可致瘤. 此細胞系因其產生HBsAg的物理化學和免疫化學特性跟HBV攜帶者血清中HBsAg相似, 因此, 可被用來研究HBV體外病毒及其與原發(fā)性肝癌的關聯(lián), 抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備及抗體制備等方面。
人肝癌細胞系優(yōu)點
(1) 在選擇實驗對象的比較上，人肝癌細胞系相較于人原代肝細胞，克服了人原代肝細胞來源困難、實驗難控制、存活時間短的局限，肝癌細胞系為已獲得的穩(wěn)定傳代的細胞，具有來源方便、操作簡單、條件可控和可重復等優(yōu)點，是用于肝癌疾病相關研究的理想對象。
(2) 肝癌細胞系均選擇來源于確診肝癌患者的病理組織，具有與肝癌患者體內相似的遺傳基因組，其發(fā)生發(fā)展機制、功能蛋白表達、病毒復制能力、侵襲轉移功能及抗藥性等，具有與人類親源體極其相近的特點，因此更適合應用于肝癌各領域的研究。
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