BCA蛋白定量與Bradford蛋白定量的區(qū)別是什么

目前實(shí)驗(yàn)室里常用的蛋白定量的方法通常主要有三種： BCA蛋白定量、Bradford蛋白定量法和紫外分光法。 

BCA 蛋白定量 的實(shí)驗(yàn)原理是在堿性條件下，H | NH2----C-COOH | R 將Cu2+還原為CU+與 BCA 結(jié)晶為紫色的化合物，再通過(guò)測(cè)定 562 nm波長(zhǎng)OD值來(lái)判定還原劑的含量。

下列表分別對(duì)兩種實(shí)驗(yàn)方法做以對(duì)比：

通過(guò)上表中的的對(duì)比，我們不難看出Bradford實(shí)驗(yàn)法的速度比較快，平常BCA 蛋白定量 的孵育時(shí)間大約30分鐘甚至更長(zhǎng)，而采用Bradford蛋白定量法則需要幾分鐘即可完成實(shí)驗(yàn)。

雖然其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性擬合程度不如BCA定量法，但它的二項(xiàng)式契合度卻較高。

（下圖顯示為：二項(xiàng)式的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作方法）

除此之外，Bradford 蛋白定量還有一個(gè)小小的缺陷，那就是它比較容易受高濃度的去垢劑影響，比如需要SDS的實(shí)驗(yàn)濃度低于0.01%，TRITON X-100的實(shí)驗(yàn)濃度低于0.005%等。

解決的辦法是：使用與Bradford 兼容的去垢劑，從而匹配到相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)濃度即可。

Bradford蛋白定量實(shí)驗(yàn)雖然實(shí)驗(yàn)在制作二項(xiàng)式標(biāo)線(xiàn)和公式計(jì)算較繁瑣，但如果能成功破解以上三個(gè)問(wèn)題，那么Bradford法對(duì)比BCA法來(lái)說(shuō)還是有不少優(yōu)勢(shì)的，比如可以節(jié)省很多時(shí)間等。對(duì)于追求實(shí)驗(yàn)效率的實(shí)驗(yàn)員來(lái)說(shuō)，熟練掌握Bradford實(shí)驗(yàn)法是個(gè)不錯(cuò)的選擇。 

以上是對(duì)蛋白定量的兩種方法做以簡(jiǎn)要對(duì)比，蘇州阿爾法生物 蘇州阿爾法生物13年的生物儀器設(shè)備與耗材的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)，主要經(jīng)營(yíng)凝膠成像 ， 微量天平、 Pcr 檢測(cè)儀、離心機(jī)、混勻儀、振蕩培養(yǎng)箱、二氧化碳振蕩培養(yǎng)箱、 微孔板振蕩器、二氧化碳培養(yǎng)箱、微生物發(fā)酵罐。還可以關(guān)注更多阿爾法生物其他產(chǎn)品如：蛋白定量試劑、滲透壓儀、電子天平、搖床、排槍移液器、旋渦混合儀、切膠儀、純水機(jī)、電泳儀、溶劑過(guò)濾器、真空泵、超低溫冰箱、離心管、實(shí)驗(yàn)室試劑盒、干細(xì)胞培養(yǎng) 等系列產(chǎn)品。部分儀器可以免費(fèi)試用， 瑞寧移液器  類(lèi)目可免費(fèi)校準(zhǔn)，免費(fèi)出具  CNAS 報(bào)告。